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Lv.3 学术阅读达人
2022/02/07 23:26
合成蛋白
研究了Fh8和H融合标签作为溶解度增强剂标签，以及它们将50种性能与欧洲分子生物学实验室蛋白质表达和纯化核心设施中的其他常用融合标签进行了比较（Costa，2013年；Costa等人，2013年a）。图2显示了使用研究的溶解度标签（His6标签、GST、MBP、NusA、Trx、SUMO、H和Fh8）从蛋白质生产到纯化的示意图路径。在这里，选定的目标蛋白质包括Pryptosporidium parvum（CP12）的12-kDa表面蛋白质，以及来自Artocarpus incisa植物的凝集素果冻素（FTL；Oliveira等人）。2008年；Oliveira等人，2009a，b；Oliveira等人，2011年），以及酵母酿酒酵母的四种蛋白质：饥饿蛋白167（RVS167）、磷脂酶D1（SPO14）和丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1和2（YPK1和YPK2）的存活率下降。这些目标蛋白质在大肠杆菌中都被称为难以表达，并呈现出不同的分子量、位置和功能。在镍亲和力纯化以及10毫升培养物和500毫升培养物中去除标签后，对其溶解度和每个聚变标签的相应效果进行了评估。这项比较研究表明，Fh8融合伴侣是众所周知的最佳融合伴侣，MBP、NusA和Trx，用于可溶性蛋白质的生产。对于测试的蛋白质，GST和H融合标签都没有提高大肠杆菌中的目标蛋白质溶解度。
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