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Lv.3 学术阅读达人
2022/02/05 22:22
大肠杆菌 蛋白质生产与纯化
最近，开发并研究了一种新颖而独特的大肠杆菌中简单廉价的可溶性蛋白质过度生产和纯化的融合系统：Fh8标签（Costa，2013年）。Fh8被评为Trx、MBP或NusA的最佳溶解度增强剂标签之一（Costa等人，2013年a），它通过使用其天然钙结合特性和温和的疏水相互作用色谱条件，对目标蛋白质进行了特定和简单的纯化（Costa等人，2013年b）。Fh8融合伴侣是目前为数不多的同时促进目标蛋白溶解度直接进入大肠杆菌细胞质和简单且具有成本效益的蛋白质纯化标签之一。新的Fh8融合系统克服了与大肠杆菌重组蛋白质生产相关的几个问题：通过使用直截了当的方法，这个新颖的系统提高了蛋白质生产水平，促进了蛋白质溶解度和低成本净化，并帮助蛋白质免疫原性，其中H标签促进了从基因到抗体的简单、快速和无佐剂生产（Costa等人，2013年c）。这种新型聚变系统具有将这四种能力组合成迄今为止描述的两个最低分子量聚变伙伴的巨大优势。因此，Fh8融合系统似乎是大肠杆菌高效、经济地重组蛋白生产的宝贵工具。虽然本审查适用于重组蛋白使用Fh8和H标签。在细菌宿主系统中的生产，希望这里介绍的新型融合系统将适用于其他宿主，例如真核生物和哺乳动物细胞，因此，必须对此进行调查。尽管融合标签被广泛用于改善大肠杆菌的可溶性蛋白质产量，但由于文献普遍缺乏关于其作用机制的研究，融合标签尚未得到很好的理解。因此，应努力披露融合标签的工作原理，同时促进大肠杆菌蛋白质生产的这种积极影响。也许，广泛的系统生物学分析可以帮助揭示聚变标签在大肠杆菌中经历的不同途径，也会导致它们组织成功能组。考虑到广泛的应用，趋势是可用的聚变标签数量将增加，对其行动方式的理解无疑将允许开发量身定制的蛋白质生产工具。
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